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制造参考DNA板

使用BioPlint来控制DNA分子可以对遗传检测进行高度准确的“规模”

背景

聚合酶链反应*广泛用于基因检测。据报道,一种基于pcr的方法甚至可以通过扩增检测单个DNA分子。该方法广泛应用于检测转基因食品、癌症和感染。一些严格的检查禁止忽略任何特定的DNA序列(目标基因)。因此,检测实验室对检测设备、试剂、检测方法进行全面的质量控制是十分重要的。

一些公司和研究机构已经交付了参考资料,其中规定了DNA类型和密度,但它们具有高密度 - DNA分子的数量在摩尔中(一摩尔相当于6.02×10)23.DNA分子)。在准确度为100分子或更少的低密度测试中使用,标准物质通常必须稀释。因此,当物质被反复稀释时,错误在分子分布的数量上累积。当密度达到低密度区域(特别是分子数小于10个的区域)时,预期的DNA分子数和实际的DNA分子数之间就会有很大的差距,得到的样本中含有的DNA分子比规定的要多,或者相反,根本没有DNA分子。

* PCR(聚合酶链式反应):酶法增加具有特定序列的DNA分子

解决方案

为基因测试提供标准尺度

为了精确验证遗传测试,装置和试剂,您需要一个“刻度”-A基准,其中DNA分子的数量在单个数字中确定。通过联合研究*,RicoH开发了一种制造规定数量的DNA分子(参考DNA板)的容器的技术。由于DNA分子的数量是准确控制的分子分子,因此该技术将使遗传测试仪,试剂和遗传检测方法进行更严格的质量控制,并提高遗传测试的可靠性。该技术将有助于预防食物和感染中的修饰基因被忽视。

*联合合作伙伴:国家农业和食品研究组织(Naro)和Fasmac

技术亮点

1.制造参考DNA板

在新开发的参考材料的过程中,遗传修饰细胞以具有插入的靶序列,使得含有待计数的靶序列的DNA分子的数量。将基因改性的细胞计数并从特殊的Bioplinting喷墨头递送到96孔板;这是这样做的,因此每个井都有规定数量的细胞。最后,将细胞壁被破坏以提取DNA。这样,参考DNA板在每个孔中用确定数量的DNA分子制造。该技术利用喷墨头的高速液滴输送,并允许通过精确控制的DNA分子的数量有效地生产参考材料。

图像:制造一个参考DNA板

2.从喷墨头输送电池和在空中滴中的计数电池

细胞大至10μm,可以引起沉降和喷嘴堵塞,因此稳定地从通用喷墨头递送它们并不容易。RicoH开发了一种特殊的生物印刷品喷墨头,用于提供细胞。头部具有简单的结构而没有流体通道,但它可以以少量溶液输送液体。RicoH还开发了一种新技术,以与递送同步地将输送的液滴与脉冲激光束进行同步,从而观察细胞的荧光并将细胞计数在液滴中。该技术使得液滴能够在电池计数时稳定地注入孔中;现在可以严格控制细胞数量。

图像:从喷墨头中传送细胞,计数细胞在空中的液滴中

3.评估参考DNA板

使用实时PCR器件来评估阈值循环(实时PCR器件的输出值,表明检测需要较少的放大次数)1至1,000个DNA分子。线性度在100个或更少的DNA分子区域中证明,过去不可能进行充分的分析;核实即使数字小,也会正确地检测DNA分子。我们可以在逻辑上得出结论,使用参考DNA板将能够为实时PCR器件生产精确度。

图片:参考DNA板的评估

理光的愿景

为了追求印刷技术的可能性,Ricoh正在寻求新客户平台的可能性。在生物医学领域,理光利用其生物监测技术,通过开放创新与其他机构和企业共同创造新的价值。目的是有助于为社会问题提供解决方案。